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　1．基本原理先將標準物或血樣品與抗血清混勻，免疫反應6～24h，使抗原與抗體充分結合，甚至達到平衡，然后再加入標記抗原，與抗體反應12～24h，zui后分離B與F，這稱為順序飽和分析法。

　　應用順序飽和加樣，可以提高測定方法的靈敏度。Utiger在做人促甲狀腺激素（TSH）放射免疫分析時，將標記物延至第2天加入，發現其靈敏度增加兩倍。如果縮短zui后的溫育時間，仍可取得滿意的結果。所以一般認為，在順序飽和加樣中，第1次溫育時間可以長，而第2次溫育時間要短，這樣可以提高靈敏度。但也有相反的意見，認為順序飽和加樣，是使用過量抗體，會使靈敏度受到一定影響。如果使用抗體不過量，溫育時間縮短，在抗原和抗體結合未達到平衡飽和時就加入標記物，這樣既不影響加靈敏度，反而比較穩定，甚至可提高靈敏度。

　　2．加樣程序　以人血漿精安酸加壓素RIA測定程序為例（直接測定）。

　　（1）加樣（單位μl；總反應體積600μl）

　　（2）孵育：4℃，24h。

　　（3）分離B與F。

　　無肽血漿，用于血漿的直接測定。其制備方法為：在電磁攪拌下，抽取2%加膜活性炭溶液5ml，共兩管，離心、去上清。血漿5ml，倒入上述活性炭管中，加蓋，充分振蕩10min，離心，上清倒入上述另一活性炭管中，振蕩10min，再離心，取上清，即無肽血漿。血漿中的生物活性物質被活性炭吸附而去除。