單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)試劑盒基本信息
趨化性細胞因子 chemokine是一個蛋白質家族，由十余種結構有較大同源性、分子量多為8～10kD的蛋白組成。這些蛋白在氨基端多含有一個或兩個半胱胺酸。根據半胱胺酸的排列方式，將趨化性細胞因子分為亞家族。兩個半胱胺酸按Cys-X-Cys(半胱胺酸-任-氨基酸-半胱胺酸)方式排列的趨化性細胞因子屬α亞家族，也稱CXC趨化性細胞因子;以Cys-Cys方式排列的趨化性細胞因子屬β亞家族，也稱CC趨化性細胞因子。氨基端只有一個半胱胺酸的趨化性細胞因子稱γ亞家族趨化性細胞因子，也稱C趨化性細胞因子。趨化性細胞因子主要由白細胞和造血微環境中的基質細胞分泌，可結合在內皮細胞的表面，具有對中性粒細胞、單核細胞、淋巴細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞的趨化和激活活性。IL-8是α亞家族系的代表，對中性粒細胞有趨化作用。單核細胞趨化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1，MCP-1)是β亞家族的代表，可趨化單核細胞。淋巴細胞趨化蛋白(lymphotactin)是γ亞家族的代表，對淋巴細胞有趨化作用。
單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)試劑盒操作方法
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體：于各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零后測各孔OD值，若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
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