亚洲综合激情五月丁香六月丨免费精品视频在线观看丨青青毛片丨久久久久国色av免费观看性色丨欧美又大又硬又粗bbbbb丨成人av网站免费丨a级黄色影院丨91看片黄色丨在线观看片免费人成视频播放丨午夜精品久久久久久久2023丨日韩欧美一区二区三区四区五区丨乱淫a欧美裸体超级xxxⅹ丨国产一二三四区乱码免费丨日本黄色三级丨久久69丨麻豆精品乱码一二三区别蜜臀在线丨国产亚洲网曝欧美台湾丝袜丨免费久久丨免费av在线播放丨浪潮av色综合久久天堂

蝦堿性磷酸酶使用注意事項(xiàng)

蝦堿性磷酸酶（Shrimp Alkaline Phosphatase,SAP)催化DNA和RNA 的5’和3’磷酸單脂的去磷酸化反應(yīng)，也可水解核糖和脫氧核糖核苷三磷酸（NTP 和 dNTP）。該酶在分子生物學(xué)研究中應(yīng)用廣泛，如去除DNA和RNA 末端的磷酸基團(tuán)，用于后續(xù)的克隆和探針末端標(biāo)記。在克隆中，載體經(jīng)蝦堿性磷酸酶去磷酸化后5’ 端無磷酸基團(tuán)，因而不可以和自身3’ 端連接。蝦堿性磷酸酶可作用于5’突出端、凹陷端和平末端，也可用來降解PCR反應(yīng)中的游離dNTP，用于制備測序模板和SNP分析。該蝦堿性磷酸酶在65℃溫育5分鐘即可完-全的、不可逆的失活，因此，在連接或末端標(biāo)記之后，可以不用去除。基于以上特性，該酶是傳統(tǒng)去磷酸化酶--小牛腸堿性磷酸酶的替代物。

 應(yīng)用

 DNA 和 RNA 的去磷酸化

防止克隆載體的自連

制備5′末端標(biāo)記模板

去除 PCR 產(chǎn)物中的 dNTP 和焦磷酸鹽

 活性定義

 1單位指在25℃條件下，30分鐘能使1μg經(jīng) HindIII（產(chǎn)生5’突出末端）消化的 pUC19 DNA 去磷酸化所需的酶量。去磷酸化標(biāo)準(zhǔn)是指在自連接反應(yīng)中能抑制＞95%的DNA 再連接。

 使用注意事項(xiàng)

 （1）1×SAP Buffer：50 mM Bis-Tris HCl pH 6.0，1mM MgCl2，0.1 mM ZnCl2，25℃ 溫育。

（2）熱失活：65℃ 加熱 5 分鐘，不可逆失活。該酶通常用于酶切載體的去磷酸化，因其不可逆熱失活特性。當(dāng)完成去磷酸化反應(yīng)后，無需再純化產(chǎn)物，可以直接用于后續(xù)連接反應(yīng)。

（3）蝦堿性磷酸酶也可以用來降解PCR反應(yīng)中的游離dNTP，用于制備測序模板和 SNP 分析。同樣無需純化，可直接用于下游實(shí)驗(yàn)。